荧光定量PCR 实时荧光定量PCR技术不仅实现了PCR从定性到定量的飞跃，而且与常规PCR相比，它具有特异性更强、有效解决PCR污染问题、自动化程度高等特点，已成为国际公认的核酸分子定量的标准方法，目前在基因表达研究和临床疾病检测等领域已得到广泛应用，使用SYBRgreen法或者 Taqman 法对 DNA/RNA 进行 real time PCR 的定量测定或型的鉴定。

       SYBR Green荧光染料法：适用于任何DNA，无需设计探针，采取双标准曲线法，实验周期短，结果重复性好，灵敏度高。 

       TaqMan荧光探针法：经验丰富的实验技术人员设计探针，对目标基因有高特异性，实验重复性好，相对于SYBR Green法，灵敏度更高。 

       荧光定量PCR绝对定量PCR-标准曲线绘制：

      绝对定量是用已知浓度的标准品绘制标准曲线来推算未知样品的量。一般我们将待测的基因序列装入已知大小的质粒中作为标准品，将标准品稀释至梯度浓度，作为底物模板进行荧光定量PCR反应。以标准品拷贝数的对数值为横坐标，以测得的CT值为纵坐标，绘制标准曲线。当检测未知样品时，使用与标准质粒相同的反应条件和相同的引物序列，扩增得出CT值，即可在标准曲线中计算出样品中目的基因拷贝数。